平板集落形成实验（适用于贴壁细胞） 前期准备： 确保所有工具如6孔板、吸管、枪头等在超净工作台上消毒30分钟，包括血球计数板和基质胶。 步骤一：细胞准备 - 取出贴壁率大于90%的对数生长期细胞，消化离心后，重悬并计数。
平板集落形成实验（适合贴壁细胞）首先，确保细胞处于对数生长期，消化离心后，将90%以上贴壁细胞重悬并计数。将细胞分组，每孔接种1000个细胞于6孔板，放入CO2培养箱培养。一周后观察，每个孔加入甲醇固定、结晶紫染色，然后清洗并拍照计数集落。
平板集落形成实验适用于贴壁细胞。实验步骤包括：选取贴壁率超过90%的细胞，进行消化、离心、重悬并计数。接下来，将1000个细胞种入6孔板中，放入CO2培养箱培养一周。在肉眼可见集落形成时，取出板子，用甲醇固定30分钟后清洗，以0.1%结晶紫染色3分钟，计数集落。软琼脂集落形成实验适用于悬浮细胞。
集落抑制率=（1-（实验组集落形成率/对照组集落形成率）×100 （一）原理 细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞，大小在0.3-0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。
首先通过将小鼠脾脏组织进行机械或酶消化处理，可以获得单细胞悬浮液。其次将获得的小鼠脾细胞悬浮液放入含有营养物质和生长因子的培养基中，提供适宜的环境条件，使细胞能够在培养皿中生长和繁殖。最后在培养基中，免疫细胞会逐渐分裂和增殖，形成细胞集落。
1、在生物科技的前沿探索中，郑州大学中科博生科研团队揭示了一种创新的实验方法——造血干细胞体外集落形成实验，它如同在实验室中模拟自然的造血环境，为我们揭示了这些细胞的生命力和分化潜力。
2、直至1961年Till等用致死量放射线照射实验小鼠，然后进行骨髓移植，成功地在脾脏形成结节，发现了造血干细胞，即这类形成脾结节的原始细胞。后采用天然性染色体及性别决定基因作为细胞遗传的标志，结合造血干细胞研究中的单个脾集落转移技术，研究结果表明脾集落生成细胞是一类多能造血干细胞。
3、集落抑制率=（1-（实验组集落形成率/对照组集落形成率）×100 （一）原理 细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞，大小在0.3-0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。
4、集落刺激因子（CSF）是一类神奇的细胞因子，它们在体内和体外都能选择性地激发造血祖细胞的活力，引导其分化成特定谱系的细胞群落，犹如生命的催化剂。
如果是这样的话，先把母液稀释10000倍，细胞密度就是28X10^5。2X10^5/28X10^5=0.07752。从稀释液中取752微升，盐水补齐至300微升。平均分装到2个皿中。
根据细胞增殖能力，将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml细胞悬液到培养皿（直径 60mm ）中，以十字方向轻轻晃动培养皿，使细胞分散均匀。（4）培养皿置 37℃ 、5%CO2中培养2~3周，中间根据培养液pH变化适时更换新鲜培养液。
取对数生长期的单层培养细胞，用0.25% 胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，把细胞悬浮在完全培养基中备用。将细胞悬液作梯度倍数稀释，以适当的细胞密度（根据增殖能力）接种于培养皿中。
动物细胞技术（animal cell technology），有时也称细胞工程（Cytotechnology），是生物技术领域中重要的组成部分，它是利用动物细胞体外培养和扩增来生产生物产品，或者作为发现和测试新药的工具。如今这一技术已广泛应用于现代生物制药的研究和生产中。
接种密度控制在10~200个／ml。在计数准确，细胞活性正常的情况下，一般稀释为20个／ml，每孔接种200μl，这样每孔落人细胞数平均为1，获得单克隆生长孔的概率最大，数量最多。有些细胞的克隆化培养效果不理想的原因与它们在低密度下没有能力生存有关。
读着菌落数就行比如100cfu/mL就读着每毫升菌落数是100。cfu是菌落形成单位，菌落形成单野数位指单位体积中的细菌、霉菌、酵母等微生物的群落总数。在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达活菌的数量。
去除T细胞可采用E-玫瑰花结法、尼龙棉法、以及补体融解法 等。 双层培养法。底层饲养层一般用2X10^5个/ml正常人外周血单个核细胞接种于含15%胎牛血清，0.5%琼脂的McCoy-5A培养基中。
[重组]人粒细胞集落 *** 因子供静脉注射须用5%葡萄糖注射剂稀释，浓度不低于15μg/ml，若rhGCSF的终浓度在2～15μg/ml之间，须在加[重组]人粒细胞集落 *** 因子之前于5%葡萄糖注射剂中先加入终浓度为0.2%的人血白蛋白，以避免输液系统对[重组]人粒细胞集落 *** 因子的吸附。
在体外研究造血细胞的过程中，一种关键的发现是某些细胞因子能够诱导造血干细胞在半固体培养基中形成聚集，这类因子被赋予了“集落刺激因子”（CSF）的名称。
造血干细胞移植及白血病化疗：推荐剂量为每天5μg/kg，待白细胞升至2×109/L以上时即可停用。
此外，CSF也作用于多种成熟的细胞，促进其功能具有多相性的作用。colony-stimulating factor，CSF；可刺激骨髓未成熟细胞分化成熟并在体外可刺激集落形成的细胞因子。骨髓造血干细胞体外半固体培养技术的建立和重组集落刺激因子（colony-stimulating factor，CSF）的问世给集落刺激因子的研究提供了前提。
在生物科技的前沿探索中，郑州大学中科博生科研团队揭示了一种创新的实验方法——造血干细胞体外集落形成实验，它如同在实验室中模拟自然的造血环境，为我们揭示了这些细胞的生命力和分化潜力。
郑大中科博生生物工程是一家致力于干细胞、免疫细胞研究、储存及应用的高新技术企业。郑大中科博生与郑州大学、中国平安保险、郑州银行全面建立战略合作，依托国家卫健委出生缺陷预防重点实验室、河南省人类遗传资源中心，联合生命科学领域顶尖的科研机构中国人民解放军军事科学院、中国科学院等国家优势资源。
河南干细胞公司都有以下这些：河南郑大干细胞库科技有限公司于2018年08月06日成立。中科博生生物工程有限公司成立于2019年。河南省华隆人类干细胞资源库股份有限公司，成立于2020年1月07日。