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流式细胞数据处理(流式细胞数据处理软件)

时间:2024-06-11

求分析流式细胞周期数据,FCS文件

1、在M期完成遗传到子细胞中的均等分配,使细胞进行分裂。细胞周期检测中PI最为常用。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。

2、打开NovoExpress,导入FCS文件即可。首先打开NovoExpress,导入一个模板为新的实验文件,然后创建一个与所选择实验文件相同模板的新文件。其次导入选择的FCS文件到当前标本,最后按照选择文件夹的层次结构导入文件夹下所有的FCS文件。

3、在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例,大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的,方便讨论。

流式细胞术的设门方法

流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点。将待测细胞染色后制成单细胞悬液。

目前最常用的方法就是使用微球阵的multiplex。早以商品化了。以BD出品的为例,你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球,每一种都是两种不同荧光强度组合,所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。

电安全问题:偏振板,激光供电等都是高电压,需要特别小心。仪器内部只能由厂家人员及相关工作人员才可操作,实验人员不得冒险操作。(2)激光安全问题:流式细胞术的激光有相应的cover保护,不得打开,否则危险。

测量速度快;可进行多参数测量;是一门综合性的高科技方法( FCM综合了光学,电子学,流体力学,细胞化学,免疫学,激光和计算机等多门学科和技术);既是细胞分析技术,又是精确的分选技术。

以及在具体的各项应用中流式细胞术的操作方法与技巧:常见问题解答篇采用一问一答的方式,根据编写人员的实践经验,对流式细胞术中常见的问题进行详细解

《 保健食品检验与评价技术规范增强免疫力功能评价方法( 征求意见稿) 》 中要求用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球试验替代巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验》, 本研究的主要 目的是在征求意见稿的基础上, 摸索最佳实验条件, 从而使该方法能灵敏稳定的反映小鼠腹腔单核一 巨噬细胞吞噬能力。

根据流式细胞仪的数据,如何分析?

流式平均荧光强度反映精确地数值。左边这张图每个峰下面积除以细胞数就是平均荧光强度,在流式细胞仪分析完结果后会出据平均荧光强度的数值,可以看原始数据。右边这张图纵坐标。流式细胞仪检测得到的都是相对值,没有单位。这个平均荧光强度也是一样。

方法 :分别用NASBA方法和流式细胞仪绝对计数法检测2 1名HIV感染者艾滋病患者的HIV病毒载量和CD4细胞数。对15名病例随访4次以上,随访时同样检测HⅣ病毒载量和CD4细胞数,并观察临床变化。

CV是指变异系数(Coefficient of Variance,CV),是评价流式细胞仪的一个重要指标,对于校准样品,其CV值越小越好,CV值越小,说明仪器校正的精度越高。校准样品包括非生物样品(荧光微球)和生物细胞样品( 人淋巴细胞、鸡红细胞等) 。目前,非生物荧光微球已有商品试剂,CV一般2%-3%。

流式细胞仪的灵活性体现在其分析模式,无论是单参数的深度解析,还是二维、三维的立体观察,它都能高效地对目的细胞进行分选,每秒高达25000个细胞的处理速度令人瞩目。